洗涤操作不规范：洗板不充分，使用手工洗板常出现。最好使用洗板机，或使用洗瓶洗涤。在两次洗板之间加30秒的浸泡。
实验中孵育温度和时间不恰当：确定每一实验步骤的孵育温度和时间是否适当。
酶加量过多：加酶前验看移液器调节量是否准确。检查稀释度，若必要进行效价测定。
封闭不完全 检查封闭液的计算量，提高封闭时间。
标本或标准品的干扰物质：做适当的对照。
显色剂受光照时间较长或污染：显色剂A和B应于使用前10分钟从冰箱取出。
整批样品放置时间过长样品污染：样品应保持新鲜，或低温保存防止污染。
缓冲液污染：制备新鲜的缓冲液。
吸头重复使用未洗净或消毒不完全而用于加酶或显色剂：吸头尽可能一次性使用。
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