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蛋白酶K(原装)-科研专用

发表时间:2016-08-26

蛋白酶K:
CAS#:39450-01-6
外观:冻干粉
说明:枯草蛋白酶类高活性蛋白酶,生物实验室常用酶之一。
该酶在较广的pH范围内(pH4-12.5)均有活性。用于
mRNA和DNA与蛋白质的分离。
特性:活性:>30U/mg
溶解性:用灭菌的50mmol/L Tris-Hcl(pH8.0),1.5mmol/l乙
酸钙溶解,配制成浓度为20mg/ml的溶液。一般为了使用
方便,可用50%的甘油溶解成10mg/ml,存放于-20℃
R:36/37/38-42 S:22-24-26-36/37
储存条件:-20℃


蛋 白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中纯化得到。据资料显示:该酶有两个ca2+结合位点,它们离酶的活性中心有一定距离,与催化机理并无直接关系。然而,如果从该酶中除去 ca2+,由于出现远程的结构变化,催化活性将丧失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以,蛋白酶k消化过程中通 常加入edta(以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用)。但是,如果要消化对蛋白酶k具有较强耐性的蛋白,如角蛋白一类,则可能需要使用含有 1mmol/l ca2+而不含edta的缓冲液。在消化完毕后、纯化核酸前要加入EGTA(ph8.0)至终浓度为2mmol/l,以鳌合ca2+。
   蛋白酶K,是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在 尿素和SDS中稳定,还具有降解天然蛋白质的能力,因而它应用很广泛,包括制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸 酶。蛋白酶K的一般工作浓度是50—100μg/ml。在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性。
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