基本知识
1. 液体培养基贮存于4 oC 冰箱,避免光照,实验进行前放在37度水槽中温热。
2. 液体培养基(加血清) 寄存期为六个月,期间glutamine 可能会分解,若细胞生长欠安,可以再添加适量glutamine。
制作参数
粉末培养基制作(以1 升为例):
1. 细胞培养基通常须添加10 % 血清,因此粉末培养基之制作体积为900 ml,pH 为 7.2 - 7.4。NaHCO3 为其他添加,若将NaHCO3 粉末直接参加液体培养基中会造成 pH 之误差,或部分过碱。因此粉末培养基及NaHCO3 粉末应分别溶解后才混合,然后用CO2 气体调整pH,而非用强酸(HCl)或强碱(NaOH),因为氯离子对细胞生长可能有影响,且贮存时培养基的pH 易发生改动。
2. 资料:
2.1. 纯水(milli-Q 水或二次至三次蒸馏水,水质量非常重要)
2.2 粉末培养基
2.3 NaHCO3 (Sigma S-4019)
2.4 电磁搅拌器
2.5 无菌血清瓶
2.6. 0.1 或0.2 mm无菌过滤膜
2.7. pH meter
2.8. 真空帮浦
2.9. CO2 气体