ELISA方法从1970年代发展到现在,已经是一项实验室基本的免疫检测技术,广泛的应用于基础研究。
1. 试剂盒特异性
ELISA试剂盒的特异性与试剂盒的关键组分--抗体对有关,若抗体对中之一为多抗,另一个必须为单抗,建议使用双单抗。在选择市面上的试剂盒时,最好先阅读相关产品的说明书,了解试剂盒的特异性和交叉反应性。
2.灵敏度和检测范围
灵敏度反映的是试剂盒检出被检物质的最低限,用户可根据自己样本中待检指标的量选择合适的试剂盒,如果待检指标水平很低,一般的试剂盒不能满足要求,可选择高敏的ELISA试剂盒。如果待检指标的浓度高于试剂盒标准曲线的最高值,则需要适当倍数稀释样本,计算结果时,乘以相应的系数倍数即可,如果样本中待检指标含量较低,一般不建议再做稀释。
3. 重复性
科学实验讲求重复性,一般ELISA试剂盒,其板内和板间变异系数应该控制在15%以内。在选择试剂盒时,要通过阅读相应的说明书或电话咨询厂家试剂盒的相关技术参数。
4. 经济性
对于选择进口品牌的试剂盒还是国产品牌的试剂盒,可根据实验室课题经费以及各品牌的产品质量和美誉度来自行选择。国际知名品牌一般质量可靠,文献引用多。建议大家通过阅读SCI文献,了解同行所使用的品牌。但国际品牌由于进口和国际运输等成本较高,因此售价也较高。国产品牌, 因省去不少物流和报关费用,与国外进口试剂盒相比价格上有比较大的优惠,而且能提供比较灵活的包装规格, 如48tests小包装。
5. 美誉度
不论选择国际品牌还是国产品牌,都要注意产品的质量、知名度和美誉度。不是说所有的国外品牌质量都可靠,有些国际品牌其实是OEM贴牌的,质量不一定有保障。还有一些公司提供的试剂盒,就更不靠谱了,相关指标的抗体,找遍全球都没有,如何开发出相应的ELISA试剂盒呢? 所以对于新手而言,一定要谨慎选择。比较可靠的国际品牌如美国的R&D systems(细胞因子等), eBioscience (细胞因子等)(现被Affymetrxi收购), Caymanchem(主要为竞争法EIA检测小分子物质)。