产品描述

Components

2x浓度的FastStart Universal SYBR Green Master (Rox)预混液含有FastStart Taq DNA聚合酶、反应缓冲液、核苷酸（dATP, dCTP, dGTP, dUTP）、SYBR Green I以及参考染料。

Quality

功能测试：每个批次都采用三种类型模板对在qPCR中的性能进行测试：高GC模板、高AT模板及长片段模板（约440 bp）。

Application

FastStart Universal SYBR Green Master (Rox) 可用于任何DNA或cDNA靶标的扩增和检测，包括那些具有高GC或AT的。
将预混液与Transcriptor First Strand cDNA合成试剂盒（Roche）结合以在两步法qRT-PCR中实现*的结果。
? qRT-PCR[1] [3] [4] [6] [8]
? qPCR[2] [5] [7] [9]

Features and Benefits

? 改善PCR灵敏和特异性。
*限度减低非特异性扩增产物的形成。

? 避免对qPCR结果的过度预计。
消除可增加量化的SYBR Green I结合量的非特异性扩增产物和引物二聚体。
? 对一系列的DNA或cDNA靶标进行扩增和检测。
扩增最长达500 bp的片段，包括高GC或高AT的。

? 在qPCR制备中节省时间和工作。
免去了降成分混合、优化MaCl₂浓度或进行其他耗时优化优化步骤的需要。

? 防止来自残留污染的假阳性结果。
使用这种含有dUTP的预混液配合尿嘧啶-DNA糖基化酶对来自之前PCR反应的残留DNA污染进行清除。

General description

SYBR Green I是一种DNA双链特异性染料。在DNA合成的每个阶段，包含在反应液中的SYBR Green I染料可与扩增的PCR产物相结合；扩增子可通过其荧光而被检测到。
热启动的实验方法已被证明可显著改善特异性、灵敏度及PCR的产量。在FastStart Taq DNA聚合酶的某些氨基酸残基上的热不稳定性封闭基团使得修改后的酶在室温（+15至+25°C）没有活性。因此，在引物可以非特异性结合的阶段并没有发生延伸。FastStart Taq DNA聚合酶可在高温（如在+95°C的预孵育步骤）下通过将封闭基团去除而被激活。

在需要ROX进行均一化的实时定量PCR系统上用于qPCR和RT-qPCR的通用即用型热启动反应预混液。

FastStart Universal SYBR Green Master (Rox) 含有一种全新的参考染料，可使其能够在所有需要使用ROX进行均一化的实时定量PCR仪上进行使用，而不需要对特定的仪器或实验方法进行修改或调整。这种即用型的2x浓度预混液含有以SYBR Green I检测形式进行实时定量DNA检测，包括qPCR和两步法qRT-PCR所需的全部试剂（除了引物和模板）。FastStart Universal SYBR Green Master (Rox)可在诸如Applied Biosystems 7900 HT Fast Real-Time PCR或Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR系统这样的仪器上生成*的结果。该产品不可用于LightCycler^®仪器。