北京批发Taq DNA 聚合酶 M1665S说明书

产品简介： 本制品是94KD的耐热的DNA聚合酶。是把Thermusaquaticus DNA Polymerase的基因经过克隆转化到大肠杆菌中进行表达后，分离提取而得到的。它与天然Taq DNA聚合酶具有相同的功能。 该酶反应需Mg2+
参与，它以双链DNA为模板催化核苷酸从5’向3’末端形成双链DNA。该酶同时具有5’→3’核酸外切酶活 性。该产品主要用于DNA的PCR扩增，DNA测序，可以很好地扩增1kb地DN**段。该产品主要包括酶、10×反应缓冲液与氯化镁溶液。

单位定义：在74℃，30分钟内，能够吸收10mmol dNTP，形成酸性不溶性物质所需的酶量为一个活性单位。
酶储存缓冲液B:50％甘油，20mM Tris-HCl（pH8.0）,100mM KCl，1mM  DTT，0.1mM edta，0.5％Tween20和0.5％Nonidet P40。

配套试剂：
1．10×反应缓冲液（不含MgCl2）: Taq DNA Polymerase 10 X Reaction buffer （without Mg2+）包含 500mM KCl, 100mM Tris-HCl （pH9.0, 25℃）, 1% Triton X-100.
            建议该缓冲液加入每种dNTP的最适浓度为0.2毫摩尔。
2．25mM MgCl2：反应中镁离子在混合物中的最终浓度由使用者根据自己需要决定。建议使用浓度在1－4毫摩尔。
注：使用前完全溶解氯化镁溶液并充分振荡几秒钟。
3．10X反应缓冲液（含MgCl2）：包含 15mM MgCl2，500mM KCl, 100mM Tris-HCl （pH9.0, 25℃）, 1% Triton  X-100. 建议该缓冲液加入每种dNTP的最适浓度为0.2毫摩尔。
注意：反复冻融可能会引起氯化镁沉淀，将缓冲液在90℃加热10分钟能恢复溶液的均一性。

质量控制：
1. 活性:大于5单位/微升。
2. Overdigest （OD） 检测: 30单位Taq DNA 聚合酶与1微克λDNA在74℃下反应16小时后，用琼脂糖凝胶电泳未检出降解的λDNA。
3. 切口酶检测: 30单位Taq DNA 聚合酶与1微克超螺旋质粒DNA在74℃下反应4小时后，用琼脂糖凝胶电泳未检出切口酶或线性DNA带。
4. 热稳定性检测: 94℃时，每微升5单位Taq DNA 聚合酶在缓冲液中的半衰期长于1小时。           
本产品为Promega M1665S，−20℃保存。
 

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