高铁血红蛋白（Methemoglobin，MetHb）为血红蛋白的氧化物，是血红蛋白分子内的亚铁离子被氧化成三价铁离子形成的。血红蛋白具有携氧能力，氧化后的高铁血红蛋白失去携氧能力，测定高铁血红蛋白含量可以衡量血液及红细胞代用品携氧能力，其测定方法对临床诊断高铁血红蛋白血症和研制红细胞代用品具有重要意义。

血红蛋白与氧结合形成氧合血红蛋白，脱氧后为脱氧血红蛋白，分别测定氧合血红蛋白、脱氧血红蛋白和高铁血红蛋白在560nm、576nm、630nm处的吸光值，利用各组分在特定波长的消光系数，可计算各组分的质量浓度百分比，再测出样本的总血红蛋白含量，即可计算得到样本的高铁血红蛋白含量。