使用选择性表面活性剂，特异性解离出CM、VLDL、HDL中的胆固醇，而不作用于LDL，解离出的胆固醇与胆固醇酯酶(CHER)和胆固醇氧化酶(CHOD)反应产生H2O2，在缺乏显色剂的情况下被消耗掉而不显色；未被分解的LDL在另一特异性表面活性剂的作用下解离，利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇（FC）和游离脂肪酸（FFA），从而把胆固醇酯转化为FC；进一步利用胆固醇氧化酶催化FC氧化，生成4-胆甾烯酮和H2O2； 利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和苯胺类似物，生成紫色化合物，其在546nm有特征吸收峰。