是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光，对细胞的毒性较低。Hoechst 33342染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。Hoechst 33342的 激发波长为346nm， 发射波长为460nm；Hoechst 33342和双链DNA结合后， 激发波长为350nm， 发射波长为461nm。

使用说明（仅供参考）：

1. 对于固定的细胞或组织：
a. 对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33342染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33342染色。
b. 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst 33342染色液，覆盖住样品即可；对于悬浮细胞，至少加入待染色样品3倍体积的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。
c. 吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。

d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。

2. 对于活细胞或组织：
a. 加入适当量Hoechst 33342染色液，必须充分覆盖住待染色的样品，通常对于六孔板一个孔需加入1mL染色液，对于96孔板一个孔需加入100微升染色液。
b. 在适宜于细胞培养的温度下培养20-30分钟。弃染色液，用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。

注意事项：
荧光染料都存在淬灭的问题，为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂。建议染色后尽量当天完成检测，活细胞或组织染色后应立即观察。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用本产品的案例（仅供参考）

In Vitro

Cell（LUAD cell， 10 ug/ml Hochest 33342， RT， 20min, PBS洗涤）

Hochest 33342 (Solarbio, Beijing, China) staining was performed to evaluate the apoptosis of LUAD cell induced by onvansertib treatment. Briefly, cells were cultured in in 6-well plates, stained with 10 ug/ml Hochest 33342 at room temperature for 20 minutes, washed with PBS, and observed under EVOS M7000 fluorescence microscope.

来源文献：Wang R, Hou Y, Geng G, Zhu X, Wang Z, Cai W, Ye J, Zhao S, Mi Y, Jiang J. Onvansertib inhibits the proliferation and improves the cisplatin-resistance of lung adenocarcinoma via β-catenin/c-Myc signaling pathway. Am J Cancer Res. 2023 Feb 15;13(2):623-637. PMID: 36895968; PMCID: PMC9989612.