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CAS
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596-09-8
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中文名称
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二乙酸荧光素
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英文名称
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Fluorescein Diacetate
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别名
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荧光素二乙酸酯;3，6-Diacetoxyfluoran;Di-O-acetylfluorescein
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纯度
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HPLC≥98%
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分子式
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C24H16O7
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分子量
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416.38
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外观（性状）
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Light yellow to yellow Solid
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储存条件
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Powder : -20℃, 2 years;In solvent(母液): -20℃, 1 month; -80℃, 6 months
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溶解性
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Soluble in DMSO
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EC
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EINECS 209-877-6
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MDL
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MFCD00005062
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InChIKey
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CHADEQDQBURGHL-UHFFFAOYSA-N
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InChI
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InChI=1S/C24H16O7/c1-13(25)28-15-7-9-19-21(11-15)30-22-12-16(29-14(2)26)8-10-20(22)24(19)18-6-4-3-5-17(18)23(27)31-24/h3-12H,1-2H3
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PubChem CID
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65047
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SMILES
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O=C1OC2(C3=C(OC4=C2C=CC(OC(C)=O)=C4)C=C(OC(C)=O)C=C3)C5=C1C=CC=C5
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描述
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Fluorescein Diacetate是一种细胞渗透性的酯酶底物。(Fluorescein Diacetate is a cell-permeable esterase substrate.)
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生物活性
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Fluorescein diacetate 是一种细胞渗透性的酯酶底物。Fluorescein diacetate 可作为人谷胱甘肽硫转移酶 Pi (hGSTP1-1) 的荧光底物。[1-2]
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In Vitro
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荧光素二乙酸酯 (FDA) 是绿色荧光染料荧光素的乙酰化衍生物[1]。荧光素二乙酸酯 (FDA) 是一种用于活体染色的荧光探针, 它是由人类Pi-类谷胱甘肽S-转移酶 (hGSTP1) 的酯水解活性在各种细胞溶质GST中选择性地激活的。在外源过表达hGSTP1的MCF7细胞中观察到对GST抑制剂敏感的荧光素二乙酸酯的荧光活化, 但在过表达hGSTA1或hGSTM1的细胞中未观察到。荧光素二乙酸酯可用作hGSTP1-1的荧光底物。为了研究荧光激活是否是由于hGSTP1活性, 荧光素二乙酸酯在体外与重组hGSTP1-1和GSH一起孵育。在hGSTP1-1和GSH的存在下观察到显着的荧光激活, 而在没有它们的情况下或当酶被热灭活时仅观察到轻微的激活。这表明荧光素二乙酸酯的荧光活化取决于hGSTP1-1活性。根据荧光增加速率和hGSTP1-1浓度之间的线性关系, 酶对1μM荧光素二乙酸酯的比活性测定为79±15nmol / min / mg蛋白质。荧光素二乙酸酯可用作荧光底物, 用于在体外评估GSTP1-1的抑制剂。对于二乙酸荧光素作为底物, Ethacrynic acid (EA) 和NBDHEX均以浓度依赖性方式抑制hGSTP1-1依赖性荧光增加, IC50分别为3.3±0.5μM和0.61±0.04μM[2]。
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细胞实验
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在实验之前, 将MCF7细胞 (2-3×105) 接种在35-mm玻璃底皿中。在成像之前, 用1mL PBS洗涤细胞, 然后在含有1μM二乙酸荧光素 (0.1％DMSO作为共溶剂) 的1mL Hanks'平衡盐溶液 (HBSS (+) 无酚红) 中在37°温育5分钟。 C。用1mL PBS洗涤细胞两次, 并在成像前加入1mL HBSS。荧光素和DsRed-Express2的荧光图像在FITC通道 (473nm激发) 和DsRed通道 (激发559nm) 中获得。获得的16位图像被分析[2]。
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数据来源文献
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[1]. Boyd V, et al. Limitations in the Use of Fluorescein Diacetate/Propidium Iodide (FDA/PI) and Cell PermeableNucleic Acid Stains for Viability Measurements of Isolated Islets of Langerhans. Curr Trends Biotechnol Pharm. 2008 Mar; 2 (2) :66-84.
[2]. Fujikawa Y, et al. Fluorescein diacetate (FDA) and its analogue as substrates for Pi-class glutathione S-transferase (GSTP1) and their biological application. Talanta. 2018 Mar 1; 179:845-852.
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Note
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以上数据均来自公开文献, Solarbio暂未进行独立验证, 仅供参考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.
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规格
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1g 10mM*1mL (in DMSO)
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单位
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瓶
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